Skip to content

Synteza prostacykliny z endonadtlenków pochodzących z płytek krwi przez hodowane ludzkie komórki śródbłonka

2 tygodnie ago

455 words

Wcześniej wykazaliśmy, że komórki śródbłonka traktowane aspiryną syntetyzują prostacyklinę (PGI2) z oczyszczonego endoperoksydu prostaglandyny PGH2 (1978. J. Biol.Chem.253: 7138). Aby ustalić, czy komórki śródbłonka traktowane aspiryną wytwarzają PGI2 z endonadtlenków uwalnianych przez stymulowane płytki krwi, płytki znakowane [3H] oznaczone kwasem arachidonowym poddawano reakcji w kuwetach agregometru z jonoforem A23187, trombiną lub kolagenem w obecności komórek śródbłonkowych traktowanych aspiryną zawieszenia. Procedura ta pozwoliła na cienkowarstwową radiochromatograficzną ocenę ilościową [3H] PGI2 jako [3H] 6-keto-PGF1. i [3H] tromboksan A2 (TXA2) jako [3H] TXB2, jak również analiza odpowiedzi agregacji płytek w tej samej próbce. W obecności komórek śródbłonka traktowanych aspiryną agregacja płytek w odpowiedzi na wszystkie trzy czynniki była hamowana. [3H] 6-keto-PGF1. odzyskano z supernatantów połączonych zawiesin komórkowych po stymulacji przez wszystkie trzy czynniki. Kolejność produkcji PGI2 zapoczątkowanej przez bodźce stanowiła jonofor> trombina> kolagen. Odzyskane ilości płytek krwi [3H] TXB2 zostały znacznie zmniejszone przez dodanie komórek śródbłonka traktowanych kwasem acetylosalicylowym. W oddzielnych eksperymentach 6-keto-PGF1. a TXB2 oznaczono ilościowo metodą radioimmunologiczną; wyniki były równoległe do wyników uzyskanych przy użyciu radioznakowania. Ilość 6-keto-PGF1. zmierzone za pomocą testu radioimmunologicznego przedstawiały ilości PGI2 wystarczające do zahamowania agregacji płytek. Te wyniki uzyskano, gdy 200 000 płytek krwi (3l) połączono z 3000-6 000 komórek śródbłonka traktowanych aspiriną / AI. Przy wyższych poziomach płytek stosunek 6-keto-PGF1. do zmniejszenia TXB2 i pojawienia się agregacji płytek. Badania kontrolne wykazały, że komórki śródbłonka traktowane aspiryną nie mogą syntetyzować PGI2 z egzogennego radioaktywnego lub endogennego arachidonianu po stymulacji trombiną. Dlatego zawiesiny komórek śródbłonka mogły wykorzystywać tylko endonoksydy ze stymulowanych płytek krwi. Zatem w naszych warunkach eksperymentalnych wytwarzanie przez komórki śródbłonka PGI2 z endonadtlenków pochodzących z aktywowanych płytek krwi można wykazać za pomocą dwóch niezależnych metod. Te warunki eksperymentalne obejmowały: (a) zwiększoną bliskość komórek śródbłonka płytek krwi, możliwą do uzyskania w mieszanych zawiesinach komórek; (b) zastosowanie zwiększonego stosunku komórek śródbłonka do płytek krwi; i (c) zastosowanie arachidonianu o wysokiej specyficznej aktywności w doświadczeniach znakowania promieniotwórczego. Ponadto, gdy mieszanina płytek krwi i komórek śródbłonka, które nie były leczone aspiryną była stymulowana trombiną, ponad dwa razy więcej 6-keto-PGF1. został utworzony niż gdy stymulowano komórki śródbłonka. Wyniki te wskazują, że komórki śródbłonka mogą w znacznym stopniu wykorzystywać endoperoksydy płytek do tworzenia PGI2.
[hasła pokrewne: zgkim lubrza, na czym polega leczenie kanałowe, parafia lubrza opolskie ]
[więcej w: na czym polega leczenie kanałowe, szpital kolejowy ciechocinek, jaworzyna krynicka narty ]