Skip to content

Interakcje między fibrynogenu i hodowanymi komórkami śródbłonka. Indukcja migracji i specyficzne wiązanie.

2 miesiące ago

473 words

Sugeruje się, że fibrynogen (fg) lub jego pochodne fizjologiczne wpływają na ruchliwość i wzrost komórek śródbłonka (EC), ale nadal brak jest bezpośredniego wsparcia dla tej koncepcji. W niniejszym badaniu zbadano zdolność fg do interakcji z EC i wywołania migracji EC. Zdolność fg do indukowania migracji do WE badano za pomocą modyfikacji techniki komory Boydena. fg w dolnym przedziale komory powodowało zależną od czasu i koncentracji migrację EC pomiędzy filtrami. fg obecne w równych stężeniach powyżej i poniżej filtra zwiększało migrację WE, ale maksymalny efekt występował niezmiennie w obecności gradientu pomiędzy dolną a górną komorą. Trypsyna lub trawienie plazminy przez fg i preinkubacja fg fragmentami Fab ze specyficznego przeciwciała całkowicie zniosły indukowaną przez FG migrację EC. Dializa FG w celu wyeliminowania małych peptydów, które mogą zanieczyścić preparat, nie wpłynęła na migrację indukowaną przez FG. Osocze otrzymane od zdrowych dawców wywoływało migrację EC, ale osocze od pacjenta z afiblinemią było całkowicie nieskuteczne. Dodanie oczyszczonego fG do afirynogennego osocza przywróciło wywołaną plazmą migrację WE. Degradacja plazminy D i E, odpowiednio 100 000 i 50 000 molowo, nie powodowała migracji do WE. Jednakże fragment E powodował zależne od dawki hamowanie wywołanej Fg migracji do WE Obserwowano bezpośrednią interakcję wysoce oczyszczonego radioaktywnego jodu z ludzkim i bydlęcym ECs. Wiązanie zależało od czasu i plateaued po 10 minutach. Nieoznakowany fg w dużym nadmiarze molowym hamował interakcję, ale niespokrewnione białka, w tym fibronektyna, albumina jaja kurzego i mioglobina, nie działały. Monospecyficzne fragmenty Fab skierowane na Fg hamowały wiązanie o 38% przy stosunku molowym 50 do 1, podczas gdy nieszkodliwy Fab powodował tylko 2% hamowania w podobnym stężeniu. Wiązanie 125I-fg z EC było nasycalne, a pozorną stałą dysocjacji 0,23 x 10 (-6) M oszacowano na podstawie izoterm wiążących. Po 30 minutach inkubacji oddziaływanie pomiędzy 125I-fg i komórkami było całkowicie odwracalne i przemieszczalne przez duży molarny nadmiar nieznakowanego fg. Autoradiografia prezentacji 125I związanego z EC na żelu poliakrylamidowym wykazała konstytutywne łańcuchy beta- i gamma B cząsteczki fg, z częściową utratą łańcucha alfa A. Oczyszczone fragmenty E i E testowano pod kątem ich zdolności do hamowania wiązania fg. Przy stosunku molowym do 400 125I-fg do fragmentu, fragment E, który także hamował migrację, konkurował o wiązanie o 44%, ale fragment D był całkowicie nieskuteczny. Dane te pokazują, że fg może specyficznie wiązać się z EC i indukować migrację tych komórek; wydaje się również, że strukturalny wymóg tej aktywności znajduje się w N-końcowej części cząsteczki
[podobne: ultradźwięki w kosmetyce, technika biegu narciarskiego, płyn lugola apteka ]
[hasła pokrewne: aktyna i miozyna, miozyna, płyn lugola apteka ]