Skip to content

Inaktywacja kalikreiny w ludzkim osoczu.

3 miesiące ago

457 words

Kalikreina osocza ludzkiego jest inaktywowana przez inhibitory proteazy w osoczu. Badanie to zostało zaprojektowane w celu określenia charakteru tych inhibitorów proteazy i oceny ich względnego znaczenia w inaktywacji kalikreiny. Dlatego kinetykę inaktywacji kalikreiny i tworzenie kompleksów inhibitorów kalikreiny badano w normalnym osoczu iw osoczu pozbawionym alfa2-makroglobuliny (alfa 2M), inhibitora C1 lub antytrombiny (AT III). Prekallikreina była aktywowana przez inkubację osocza z siarczanem dekstranu w temperaturze 4 ° C. Po maksymalnej aktywacji kalikreinę inaktywowano w temperaturze 37 ° C. Hamowanie aktywności amidolitycznej kallikreiny w osoczu z niedoborem AT III było zbliżone do szybkości dezaktywacji kalikreiny w normalnym osoczu. Wskaźnik inaktywacji kallikreiny w osoczu z niedoborem alfa 2M był nieznacznie zmniejszony w porównaniu z prawidłowym osoczem, ale w przeciwieństwie do prawidłowego, z niedoborem inhibitora C1 i osoczem z niedoborem AT III, aktywność amidolityczna kallikreiny nie pozostała po inaktywacji, która była oporna na hamowanie przez inhibitor trypsyny soi. Tłumienie aktywności kalikreiny w osoczu z niedoborem inhibitora C1 było znacznie zmniejszone, co było jeszcze bardziej wyraźne w niedoborach osocza zarówno w przypadku inhibitora C1, jak i alfa 2M. Stałe szybkości pseudo pierwszego rzędu dla inaktywacji kalikreiny w normalnym osoczu z niedoborem AT III, niedoborem alfa 2M, niedoborem inhibitora C1 i niedoborem osocza w obu inhibitorach alfa 2M i C1 wynosiły 0,68, 0,60, 0,43, 0,07, i 0,016 min-1, odpowiednio. Elektroforeza w żelu poliakryloamidowym z dodecylosiarczanem w gradiencie siarczanu sodu wykazała, że podczas inaktywacji kallikreiny w osoczu powstały kompleksy o wysokiej Mr z Mr 400,000 – 000 000, 185 000 i 125 000 – 135 000, które zidentyfikowano jako kompleksy 125I-kalikreiny z alfa 2M, Odpowiednio inhibitor C1 i AT III. Ponadto obserwowano obecność niezidentyfikowanego kompleksu inhibitora kalikreiny w osoczu z niedoborem AT III. 52% z 125I-kalikreiny było związane z inhibitorem C1, 35% z alfa 2M i 13% z AT III i innym inhibitorem proteazy. Podobny rozkład 125I-kalikreiny zaobserwowano, gdy kompleksy inhibitorów 125I-kalikreiny zostały usunięte z osocza za pomocą immunoadsorpcji z nierozpuszczalnym inhibitorem anty-C1, przeciwciałem anty-alfa 2M lub przeciw AT III. Wyniki te sugerują, że tylko kowalencyjne kompleksy powstają pomiędzy kalikreiną i jej inhibitorami w osoczu. W funkcji czasu, 125I-kalikreina tworzy kompleksy z inhibitorem C1 z większą szybkością niż przy alfa 2M. Nie zaobserwowano żadnej różnicy między szybkością inaktywacji kallikreiny w osoczu z wysokim poziomem kininogenu Mr a tym, że w osoczu z wysokim stężeniem kininogenu Mr rekonstytuowano kininogen o wysokiej Mr; sugeruje to, że kininogen o wysokiej M. nie chroni kalikreiny przed inaktywacją w środowisku plazmy. Wyniki te wykazały ilościowo główne role inhibitora C1 i alfa 2M w inaktywacji kallikreiny w osoczu.
[więcej w: jaworzyna krynicka narty, ibuprofen lgo, choroba werdniga hoffmana ]
[patrz też: dialab krzycka, seretide dysk, ibuprofen lgo ]